加拿大28计划方案

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稳转株构建

外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的蛋白,称稳定细胞系。高质量的稳定细胞系在生物学研究中扮演着非常重要的角色,包括基因功能研究、重组抗体、药物开发等。

构建一个有效的细胞系是一件复杂而费时的工作。菩禾作为专业的生物医药研发服务机构,拥有系列稳定细胞系构建专利技术及丰富的哺乳动物细胞培养经验,可以为您提供各种细胞系定制服务。我们已经众多客户构建了各种各样的定制细胞系,包括基因过表达(Reporter细胞系、GPCR细胞系、离子通道细胞系等)、KnockdownKnockout细胞系等。

我们深知科研工作的时间宝贵,因此致力于提高效率,提供优质高效的细胞系定制服务。我们构建的细胞系可直接应用于各种下游的生物学研究,包括基因调控、蛋白质工程、重组抗体制备、药物研发等。

载体构建:目的基因过表达或沉默载体的构建。

病毒包装:表达载体、辅助质粒共转染293FT细胞,收集病毒上清,纯化和浓缩病毒颗粒。若选择转染,则跳过此步。

转染、转导:电转染或转染试剂(脂质体等)进行细胞转染,或病毒转导。

筛选:根据表达载体的筛选基因选择药物进行筛选,如嘌呤霉素、G418等。

扩大培养:将筛选出的单克隆细胞进行扩大培养。

鉴定:PCR、Q-PCRwestern等从DNAmRNA蛋白水平进行检测。


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