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细胞划痕/侵袭

1)技术简介:加拿大28计划方案细胞迁移即细胞划痕法,是测定细胞迁移运动与修复能力的方法,类似体外伤口愈合模型。在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其他硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间,取出细胞培养板,观察周边细胞是否生长至中央划痕区,以此判断细胞的生长迁移能力,实验通常需设定正常对照组和实验组,实验组是加了某种处理因素或药物、外源性基因等组别,通过不同分组之间的细胞对于划痕区的修复能力,可以判断各组细胞的迁移与修复能力。当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。

2)实验步骤/流程图:

1、培养板接种细胞之前先用marker笔在12孔板背面画横线标记(方便拍照时定位同一个视野)。

2、细胞消化后接入12孔板,数量以贴壁后铺满板底为宜(数量少时可培养一段时间至铺满板底)。

3、细胞铺满板底后,用1ml枪头垂直于孔板制造细胞划痕,尽量保证各个                     划痕宽度一致。(人工枪头制造划痕难以保证划痕宽度的一致性,影响实验结果, 这也是该方法最大的缺陷)。

加拿大28计划方案 4、吸去细胞培养液,用PBS冲洗孔板三次,洗去划痕产生的细胞碎片。

5、加入无血清培养基,拍照记录。

6、将培养板放入培养箱培养,每隔4-6小时取出拍照。

7、根据收集图片数据分析实验结果。

3)客户需提供资料:

客户提供检测样本(细胞,客户提供处理好的细胞,或者我们代培养及处理细胞,则需收取相应的细胞扩培及处理费用大约需要5*10^5/样)

4)最终提供客户资料:

1、细胞划痕实验原始电子图片;100或200×   3张;

2、详细实验报告,包含所需试剂耗材、仪器设备、操作过程。

5) 示例展示:


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