加拿大28计划方案

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PCR/RT-qPCR检测

1)技术简介:实时荧光定量PCR(real-time quantitativePCR)/QRT-PCR,  是指在PCR反应体系中加入荧光标记物,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。荧光定量PCR不仅实现真正实现了绝对定量,而且具有灵敏度和特异性、高能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点。随着生物芯片技术和荧光探针定量技术的结合,荧光定量PCR在医学检测及其他各个领域中的应用前景十分广阔。

2)实验步骤/流程图:在PCR扩增过程中,随着PCR循环数的递增,PCR产 物不断积累,荧光信号也会相应的增加,这样就可以通过荧光强度的变化来对PCR反应进行实时的监测,并以b-Actin或GAPDH等管架基因作为内参照,对目的基因的表达量进行半定量检测。可依据具体实验需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探针法。通过对DNA或RNA的荧光定量PCR监测, 从而实现基因的相对定量、绝对定量和定性分析。

3)客户需提供资料:检测样本

细胞:细胞扩培费用(300/1*10^6细胞量,大概5*10^5的细胞量能做20个样左右。

组织:干冰运输或者提取RNA Triozl运输

4)最终提供客户资料:

1、RNA浓度及荧光定量PCR原始数据;

2、详细实验报告一份,含荧光定量PCR完整的实验步骤、使用仪器、软件设置参数等。

5)示例展示:



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