加拿大28计划方案

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原位杂交

1)技术简介:原位杂交(in situhybridization histochemistry;ISH)属于分子杂交的一种,是一种应用标记探针与组织细胞中的待测核酸杂交,再应用标记物相关的检测系统,在核酸原有的位置将其显示出来的一种检测技术。原位杂交的本质就是在一定的温度和离子浓度下,使具有特异序列的单链探针通过碱基互补原则与组织细胞内待测的核酸复性结合而使得组织细胞中的特异性核酸得到定位,并通过探针上的标记物使得对应的检测系统将其在核酸的原有位置上显示出来。

2)实验步骤/流程图:利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,形成杂交的双链。

1、两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,通过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA、RNA-RNA双键分子;

2、应用带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S、32P,荧光素、生物素、 地高辛等非放射性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交;

3、用放射自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在与定位;

3)客户需提供资料:

加拿大28计划方案 1。请提供尽量多的实验材料;

2.客户须在实验开始前确保其细胞或组织中有目的基因的表达,并提供目的基因的相关信息(基因名称、序列等信息);
3.实验所需的探针,可以由您自己提供,也可以委托本公司设计合成。如果由您自己提供,必须确保探针的质量,本公司不接受已溶解的探针。

4)最终提供客户资料:

1。原位杂交实验结果的相关图表

2。完整的实验过程报告;

5)示例展示:


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