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Crispr/CAS9检测

    CRISPR 序列及其 CasCRISPR 相关)基因编码适应性免疫系统,保护细菌和古细菌免受病毒(噬菌体)和质粒感染。RNA 指导的 DNA 内切核酸酶 Cas9 与双重 RNA 指导(CRISPR RNA[crRNA])和反式激活 RNA [tracrRNA] 或合成单指导 RNAsgRNA)缔合,并切割双链 DNA 指导 RNA 互补的序列。双链断裂发生在 PAM 位点上游 3bp 处,允许通过两个 DNA 修复途径进行靶向序列修饰:引入移码插入和缺失突变的非同源末端连接(NHEJ),导致功能丧失等位基因和同源定向修复(HDR),用于在靶基因序列处精确插入点突变或期望序列的片段。目前,CRISPR-Cas9 系统已应用于多种模式生物,包括人,小鼠,大鼠,斑马鱼,线虫,植物和细菌。

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