加拿大28计划方案

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AB-PAS染色

1)技术简介:

阿利新蓝和PAS技术联合使用可鉴别同一组织切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。这种技术也常用作广泛检测黏蛋白的手段。该技术染色阴性,可明确断定该物质不是黏蛋白。在大多数方法中,切片先经标准的阿利新蓝(pH值为2.5)染色,在使用PAS技术。阿利新蓝可将唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成蓝色。PAS技术可将中性黏蛋白染成深红/红紫色,同时将既含中性黏蛋白有含酸性黏蛋白的组织和细胞染成深浅不同的紫色,这是有于阿利新蓝与Schiff试剂结合并反应。上述染色常可出现在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白的小肠杯状细胞中。
   阿利新蓝是类铜钛花青染料,这种阳离子染料与酸性基团结合,也即阿利新蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。分子中带正电荷的盐键与酸性黏蛋白多糖物质中带负电荷的酸性基团结合形成不溶性的复合物而呈蓝色,再于PAS进行复合染色,就能显示三种不同黏液物质成分。

2)实验步骤/流程图:

1、脱蜡至水,蒸馏水水洗2min。

2、阿利新蓝染色液染色 10 -20min。

3、蒸馏水洗3次, 每次1-2min。

4、放入过碘酸溶液中 进行氧化5min。

5、Schiff Reagent 浸染 10- 20min。

6、倾去Schiff Reagent,流水冲洗10min。

7、(可选)苏木素染色液染核1-2min。

8、用酸性分化液分化2-5s, 水洗。

9、用Scott 蓝化液返蓝,水洗3min。

10、遂级常规乙醉脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

3)客户需提供资料:细胞或者组织或者蜡块

4)最终提供客户资料:

1、原始染色结果实验图片。

2、详细实验报告,含所需试剂耗材、仪器设备、操作过程。

5) 示例展示:


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