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蕃红固绿染色(软骨)

1)技术简介:

改良番红0-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结台呈现红色,嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色,与呈现红色的软骨对比鲜明,从而将软骨组织和骨组织区分开。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料,其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合。番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系,间接反映基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时,软骨中的糖蛋白会释放出来,使基质成分分布不均匀,从而导致番红0淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析。固绿与胶原纤维结合,不宜褪色。番红O-固绿染色的分化很关键,分化过度易导致切片不着色,分化不足易导致切片着色过深。

2)实验步骤/流程图:

1、标本的处理:10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。

2、常规脱蜡至水。

3、入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。

4、酸性乙醇分化液分化15s。

5、蒸馏水洗1min。

6、在固绿染色液内浸染5min,蒸馏水洗1min。

7、入Safranin Ostain内浸染1 -2min ,蒸馏水洗1min。

加拿大28计划方案 8、 用乙酸溶液洗涤切片1-2min ,以便去除残留的固绿,蒸馏水洗1min。

9、分别用95%乙醇、 无水乙醇脱水。

10、二甲苯透明,光学树脂封固。

3)客户需提供资料:组织或者蜡块

4)最终提供客户资料:

1、原始染色结果实验图片。

2、详细实验报告,含所需试剂耗材、仪器设备、操作过程。

5) 示例展示:


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